FLÁVIO HENRIQUE DE LIMA FERNANDES

Dados de Conclusão:

Resumo: 

Arbovírus são patógenos transmitidos por vetores artrópodes através de ciclos silvestres e urbanos, sendo um problema de saúde pública mundial com impacto socioeconômico. No Brasil, as arboviroses são transmitidas principalmente por A. aegypti, com destaque para DENV, no entanto, outras arboviroses causadas por membros dos Flavivirus e Alphavirus são subnotificadas devido à sintomatologia inespecífica e reatividade cruzada em testes sorológicos, demandando pesquisas específicas para as mesmas. A cidade de Jataí-GO possui clima tropical e bioma cerrado, com surtos de arboviroses ocorrendo todos os anos e, em poucos casos são solicitados exames moleculares para determinar cada vírus. A técnica de RT-PCR permite a identificação direta do material genético dos vírus circulantes, cujos novos genótipos leva a introdução de novas variantes nos bancos de dados digitais. Este estudo tem como objetivo detectar arbovírus para caracterizá-los geneticamente, através de amostras obtidas de pacientes atendidos no HEJ. Foi realizado a triagem das amostras de pacientes em período de viremia, seguida da extração de RNA de amostras e dos controles (YF) e produção de DNA complementar por RT-PCR e, análise de pureza em Nanodrop com posterior amplificação em PCR-Nested com visualização das bandas em gel de agarose. Os amplicons foram sequenciados pelo laboratório ACTGene (Alvorada-RS) para aplicação filogenética e, obtidas as sequências, submeteu-se às mesmas ao BLAST e realizou-se a otimização dos testes moleculares. As bandas obtidas apresentaram tamanho inferior a 100 pb e as análises das sequências não se compararam a qualquer fragmento viral. Testes de otimização de eletroforese e ensaios moleculares foram conduzidos para contornar o problema, mas não houve produção de amplicons. Ao final, foi apresentada uma revisão narrativa sobre os avanços no diagnóstico dos Flavivirus, com foco em biossensores, como alternativa para o trabalho. Concluindo, não foi possível amplificar os arbovírus em pesquisa devido à perda da estabilidade dos reagentes ocasionado pelas quedas de energia na Universidade, impedindo o avanço do projeto para as etapas de análise filogenética e correlação estatística da sintomatologia com o tipo de infecção. Os biossensores foram demonstrados como sendo promissores para aprimoramento do diagnóstico do Flavivirus dengue por serem simples, baratos, sensíveis e específicos.

BIBLIOTECA WEB DA UFJ

Dissertação não disponibilizada.